本申請涉及化學分析領域，具體涉及一種同時檢測植物中37種酚類物質的hplc方法。
背景技術：
1、酚類物質是植物體內廣泛存在的一類次生代謝產物，具有多種生物學活性。根據其化學結構的不同，酚類物質可以分為黃酮類、酚酸類、單寧類、木脂素類等。其中黃酮類又可以被細分成黃烷醇、黃酮醇、黃酮、異黃酮、黃烷酮和花青素。這些化合物普遍存在于水果、蔬菜、茶葉、咖啡、紅酒、堅果以及其他植物性食品中。酚類物質的主要生理活性在于其直接的抗氧化作用。隨著研究的進行，酚類物質也被證明對心血管健康、認知功能改善、抗癌、抗糖尿病等方面具有潛在有益作用。
2、酚類物質不僅在提高食品的營養價值方面具有重要意義，其在食品安全、功能性食品開發等領域中的應用也備受關注，如酚類物質作為天然染料、天然防腐劑、生物活性膜以及益生元等應用的開發都具有了大量研究。除食品工業外，酚類物質也被討論應用于化妝品工業、紡織工業等。植物多酚的含量、種類和分布情況直接影響植物源食品的質量和功能。因此，酚類物質的快速、高效檢測不僅是食品質量評估的重要指標，也為酚類物質應用與開發提供了重要依據。
3、植物多酚的定性和定量檢測方法經歷了多年的發展，常見的檢測技術包括分光光度法、液相色譜法(lc)、氣相色譜法(gc)和質譜法(ms)等。其中，分光光度法僅適用于總酚含量的快速檢測，不能分析酚類物質單體的含量；氣相色譜法由于需要繁瑣的衍生化處理且酚類物質普遍揮發性有限等原因使其較少的應用于植物多酚的檢測。液相色譜法是最常用的多酚檢測手段，其可以與紫外檢測器(uv)、光電二極管陣列檢測(pda)以及熒光檢測器(fld)聯合使用，從而具有低成本、高通用性的優點。
技術實現思路
1、本申請旨在開發一種基于高效液相色譜(hplc)的快速高效檢測方法，基于hplc-pda對37種常見植物多酚進行分離與定量檢測，對方法的靈敏度、精密度和準確性進行評價，從而開發一種快速、低成本、準確且具有廣泛適應性的植物多酚檢測方法。
2、一種基于hplc同時檢測中37種酚類物質的方法，包括：
3、采用hplc-pda進行分離和檢測；其中，檢測條件為：
4、色譜柱為pfp色譜柱；檢測波長為280nm、330nm和360nm；流速為0.5～0.8ml/min；進樣量為8～12μl；柱溫為28～32℃；流動相a為含質量百分數0.3％甲酸的水溶液，流動相b為甲醇；
5、洗脫梯度為：按體積百分比計，0-10min，95-90％流動相a和5-10％流動相b；10-16min，90-75％流動相a和10-25％流動相b；16-25min，75-60％流動相a和25-40％流動相b；25-50min，60-40％流動相a和40-60％流動相b；50-55min，40-33％流動相a和60-67％流動相b；
6、所述37種酚類物質為：
7、楊梅素、香葉木素、木犀草素、金絲桃苷、異槲皮苷、對羥基苯甲酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、芥子酸、表沒食子兒茶素沒食子酸酯、沒食子兒茶素沒食子酸酯、表沒食子兒茶素、沒食子兒茶素、兒茶素、表兒茶素、沒食子酸、阿魏酸、槲皮苷、槲皮素、異鼠李素、蘆丁、原兒茶酸、異鼠李素-3-o-新橙皮苷、水仙苷、對香豆酸、綠原酸、原花青素b1、木犀草苷、楊梅苷、圣草酚、花旗松素、漆黃素、染料木素、山奈酚、山奈酚-3-o-槐糖苷、山奈酚-3-o-蕓香糖苷。
8、可選的，所述流速為0.6ml/min；所述進樣量為10μl；所述柱溫為30℃。
9、可選的，所述色譜柱為hypersil?gold?pfp色譜柱；色譜柱的固定相為pfp(五氟苯基丙基)，直徑4.6mm，長度100mm，粒徑3μm。
10、最優選的，所述檢測條件為：
11、色譜柱為hypersil?gold?pfp色譜柱；檢測波長為280nm、330nm和360nm；流速為0.6ml/min；進樣量為10μl；柱溫為30℃；流動相a為含質量百分數0.3％甲酸的水溶液，流動相b為甲醇；
12、洗脫梯度為按體積百分比計，0-10min，95-90％流動相a和5-10％流動相b；10-16min，90-75％流動相a和10-25％流動相b；16-25min，75-60％流動相a和25-40％流動相b；25-50min，60-40％流動相a和40-60％流動相b；50-55min，40-33％流動相a和60-67％流動相b。
13、可選的，還包括：從待測植物中獲取植物提取物的過程。
14、可選的，所述獲取植物提取物的過程包括：
15、將各測試樣品粉碎后過60目篩網，取樣品粉末加入含80％甲醇的水溶液進行超聲輔助提取，該步驟中，樣品粉末與提取溶液的料液比為1：25，提取時間為30min；超聲提取后，5000rpm下離心10min后收集上清液，重復提取兩次，合并提取液，提取液經0.22μm濾膜過濾后即得所述植物提取物，作為檢測樣品。
16、可選的，所述植物樣品來源于沙棘。例如，沙棘葉、沙棘果渣或沙棘果粉等。
17、本申請具有如下有益效果：
18、本申請的方法可用于同時對樣品中37種具代表性的酚類物質進行準確定量。經過方法學驗證，方法具有良好的線性、精密度與準確性，日內與日間精密度均低于3％，加標回收率為96.88-103.75％。利用此方法對不同來源的沙棘樣品和其他植物樣品進行了檢測，證明了方法具有良好的普適性。該方法可用于食品分析、植物研究、成分開發等多個領域，具有廣泛的應用價值。
1.一種基于hplc同時檢測植物中37種酚類物質的方法，其特征在于，包括：
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述流速為0.6ml/min；所述進樣量為10μl；所述柱溫為30℃。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述色譜柱為hypersil?gold?pfp色譜柱。
4.根據權利要求3所述的方法，其特征在于，色譜柱的固定相為五氟苯基丙基pfp，直徑4.6mm，長度100mm，粒徑3μm。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，還包括：從待測植物中獲取植物提取物的過程。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述獲取植物提取物的過程包括：
7.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述植物樣品來源于沙棘。
8.根據權利要求7所述的方法，其特征在于，所述植物樣品為沙棘葉、沙棘果渣或沙棘果粉。