国产精品无码一区二区三级,免费无码又爽又刺激网站,女人18一级毛片免费观看,久青草国产在线观看,91网在线,大桥未久亚洲一区二区,国产午睡沙发系列大全,免费无码又爽又刺激高潮的视频免费

      一種免疫檢測試劑盒及其應用的制作方法

      文檔序號:42324584發布日期:2025-07-01 19:41閱讀:6來源:國知局

      本公開涉及光激化學發光,具體涉及一種免疫檢測試劑盒及其應用。


      背景技術:

      1、化學發光免疫分析是目前世界公認的先進的體外免疫診斷技術,廣泛應用于醫療診斷領域,其中酶促化學發光、直接化學發光、電化學發光是主流化學發光技術。

      2、鉤狀效應(hook效應)是指免疫檢測中采用雙抗體夾心法時,在一定濃度范圍內,分析物濃度與檢測信號呈正比,但超出某一界定濃度后,信號值反而下降的現象。發生hook效應時,化學發光儀一般沒有數據報警,除了結合臨床信息進行研判和對比稀釋后結果外,并不能輕易察覺,如果不加以甄別處理,假性低值的報告會嚴重誤導臨床診斷。

      3、在化學發光免疫分析中,傳統檢測方法的檢測范圍有限,常用解決方法是采用合適的稀釋方法,對存疑樣本進行稀釋,但稀釋操作較為費時費力,且偶有發生不能一次稀釋達到符合檢測要求的情況。


      技術實現思路

      1、為了解決上述至少一個問題,本公開提供了一種免疫檢測試劑盒及其應用。

      2、根據本公開的第一方面,提供了一種免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括:

      3、第一抗體/抗原包被的發光/感光微球;

      4、配體修飾的第二抗體/抗原;

      5、受體修飾的感光/發光微球a;和

      6、第三抗體/抗原包被的感光/發光微球b。

      7、在一些實施方式中,所述發光微球a和所述發光微球b包含相同的鑭系元素金屬以使其能夠發出相同波長的信號。

      8、在一些實施方式中,所述鑭系元素選自鑭、鈰、鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿和镥。

      9、在一些實施方式中,所述配體和所述受體互相特異性結合。

      10、在一些實施方式中,所述配體和所述受體包括以下任一項的組合:抗原或其片段/抗體、納米金/碘乙酰-巰基、氨基-醛基/羧基/異硫氰基、硅烷基/丙烯酰胺、親和素或鏈霉親和素/生物素或生物素類似物、抗體/抗抗體、半抗原/抗體、肽段標簽/抗標簽抗體、可基因編碼的多肽/蛋白質反應對。

      11、根據本公開的第二方面,提供了一種免疫測定方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:

      12、1)對含待測目標抗原/抗體的待測樣本進行免疫反應;

      13、2)加入受體修飾的感光/發光微球a,形成第一發光復合物m,經激光照射,檢測所述第一發光復合物m的發光信號rlu1;

      14、3)判定發光信號rlu1≤第一閾值,則終止反應;

      15、判定發光信號rlu1>第一閾值,則加入第三抗體/抗原包被的感光/發光微球b,形成第二發光復合物n,經激光照射,檢測所述第二發光復合物n的發光信號rlu2;

      16、4)基于發光信號rlu1或發光信號rlu2,計算所述待測樣本中的待測目標抗原/抗體的濃度。

      17、在一些實施方式中,所述發光信號rlu1與所述發光信號rlu2的檢測波長相同。

      18、在一些實施方式中,步驟1)包括:添加第一抗體/抗原包被的發光/感光微球和配體修飾的第二抗體/抗原,以與目標抗原/抗體形成第一夾心復合物和第一復合物;

      19、其中,所述第一夾心復合物含有所述第一抗體/抗原包被的發光/感光微球、所述目標抗原/抗體和配體修飾的第二抗體/抗原,所述第一復合物含有包被有所述第一抗體/抗原包被的發光/感光微球和所述目標抗原/抗體。

      20、在一些實施方式中,所述配體/受體包括抗原或抗原片段與抗體的組合、納米金/碘乙酰(iodacetyl)-巰基、氨基-醛基/羧基/異硫氰基、硅烷基-丙烯酰胺或鏈霉親和素與生物素的組合。

      21、在一些實施方式中,所述配體/受體包括鏈霉親和素和生物素的組合。

      22、在一些實施方式中,所述受體修飾的感光/發光微球a與所述第一夾心復合物結合形成第一發光復合物m。

      23、在一些實施方式中,所述第三抗體/抗原包被的感光/發光微球b和所述第一復合物形成第二發光復合物n。

      24、在一些實施方式中,所述第一抗體/抗原和所述第二抗體/抗原分別與目標抗原/抗體上的不同位點結合。

      25、在一些實施方式中,所述第一抗體/抗原和所述第三抗體/抗原分別與目標抗原/抗體上的不同位點結合。

      26、在一些實施方式中,所述第二抗體/抗原和所述第三抗體/抗原分別與所述目標抗原/抗體上的相同位點結合。

      27、在一些實施方式中,步驟4)還包括以下步驟:

      28、當判定發光信號rlu1≤第一閾值,終止反應后,將所述發光信號rlu1代入第一定標曲線計算所述待測目標抗原/抗體的濃度;

      29、判定第二閾值≤rlu2≤第三閾值時,基于發光信號rlu1和發光信號rlu2,計算發光信號rlu3,將rlu3代入第二定標曲線計算所述待測目標抗原/抗體的濃度,其中所述rlu3=rlu2-k×rlu1,k為rlu1的信號衰減系數;

      30、判定rlu2>第三閾值時,報告所述待測目標抗原/抗體的濃度超出檢測范圍。

      31、在一些實施方式中,所述定標曲線的建立包括以下步驟:

      32、s1)對標準品進行免疫反應,其中所述標準品包括多個經梯度稀釋的目標抗原/抗體;

      33、s2)加入所述受體修飾的感光/發光微球a,形成第一發光復合物m',經激光照射,檢測所述第一發光復合物m'的發光信號rlu1';

      34、s3)加入所述第三抗體/抗原包被的感光/發光微球b,形成第二發光復合物n',經激光照射,檢測所述第二發光復合物n'的發光信號rlu2';

      35、s4)計算發光信號rlu1'與對應的標準品中的目標抗原/抗體濃度的皮爾遜相關性系數,將皮爾遜相關系數≥0.99的n個發光信號rlu1'及其對應的標準品中的n個目標抗原/抗體濃度進行線性擬合,得到第一定標曲線;

      36、s5)計算發光信號rlu1'的衰減系數k;

      37、s6)基于衰減系數k,計算發光信號rlu3’,其中rlu3'=rlu2'-k×rlu1';

      38、s7)計算發光信號rlu3'與對應的標準品中的目標抗原/抗體濃度的皮爾遜相關性系數,將皮爾遜相關系數≥0.99的m個發光信號rlu3'及其對應的標準品中的m個目標抗原/抗體濃度進行線性擬合,得到第二定標曲線。

      39、在一些實施方式中,所述第一定標曲線對應公式1,所述公式1如下:

      40、公式1:rlu1=a1×目標抗原/抗體的濃度+b1。

      41、在一些實施方式中,所述第二定標曲線對應公式2,所述公式2如下:

      42、公式2:rlu3=a2×目標抗原/抗體的濃度+b2。

      43、在一些實施方式中,所述發光信號rlu1'與所述發光信號rlu2'的檢測波長相同。

      44、在一些實施方式中,所述衰減系數k為n個衰減系數kn的平均值,所述第n個衰減系數kn通過所述第n個發光信號rlu1'和對應濃度的第n個發光信號rlu2'計算。

      45、在一些實施方式中,將所述n個發光信號rlu1'中的最高數值乘以預設倍數,確定為第一閾值;將所述m個發光信號rlu3'中的最低數值乘以預設倍數,確定為第二閾值;將所述m個發光信號rlu3'中的最高數值乘以預設倍數,確定為第三閾值。

      46、在一些實施方式中,所述預設倍數選自1.0~1.5。

      47、在一些實施方式中,所述預設倍數選自1.0、1.01、1.02、1.03、1.04、1.05、1.06、1.07、1.08、1.09、1.1、1.11、1.12、1.13、1.14、1.15、1.16、1.17、1.18、1.19、1.2、1.21、1.22、1.23、1.24、1.25、1.26、1.27、1.28、1.29、1.3、1.31、1.32、1.33、1.34、1.35、1.36、1.37、1.38、1.39、1.4、1.41、1.42、1.43、1.44、1.45、1.46、1.47、1.48、1.49或1.5。

      48、在一些實施方式中,所述免疫測定為光激化學發光檢測。

      49、在一些實施方式中,所述發光微球包含鑭系元素金屬。

      50、在一些實施方式中,所述鑭系元素金屬選自鑭、鈰、鐠、釹、钷、釤、銪、釓、鋱、鏑、鈥、鉺、銩、鐿、镥中的至少一種。

      51、在一些實施方式中,所述待測樣本選自血液、血漿、血清、尿液、精液、唾液、細胞培養物、組織樣本中的一種或多種。

      52、根據本公開的第三方面,提供了一種免疫測定系統,所述系統用于實現第二方面所述的方法,所述系統包括:

      53、免疫反應元件,用于與待測目標抗原/抗體形成第一發光復合物m/m'和第二發光復合物n/n';

      54、獲取信號元件,用于激發和記錄信號值,

      55、處理器,用于計算并獲得信號值對應的待測目標抗原/抗體在待測樣本中的濃度。

      56、根據本公開的第四方面,提供了第一方面所述試劑盒、第二方面所述方法、或第三方面所述系統在檢測目標抗原/抗體中的應用。

      57、在一些實施方式中,所述目標抗原/抗體包括疾病標志物。

      58、在一些實施方式中,所述疾病標志物包括腫瘤標志物、心肌標志物、甲功標志物、性激素標志物、傳染病標志物、炎癥標志物等。

      59、在一些實施方式中,所述腫瘤標志物包括糖類抗原。

      60、在一些實施方式中,所述腫瘤標志物包括ca19-9抗原、ca15-3抗原、ca72-4抗原等。

      61、本公開所述檢測方法,因待測樣本不需進行稀釋操作而更加省時省力;與傳統方法的直接檢測相比,提升檢測范圍,可實現改善hook效應的目標。

      當前第1頁1 2 
      網友詢問留言 已有0條留言
      • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
      1
      主站蜘蛛池模板: 亚洲黄片久久| 松阳县| 日韩人妻少妇一区二区三区| 江川县| 亚洲av色香蕉一区二区三区蜜桃 | 国产精品丝袜美女在线观看| 中文字幕一区二区人妻痴汉电车| 日本一区二区三区最新不卡视频| 国产精品一区二区久久毛片| av中文字幕一区二区三区| 免费无码AⅤ片在线观看| 国产精品制服一区二区| 永春县| 内江市| 日本口爆吞精在线视频| 国产一区二区三区杨幂| 亚洲欧洲无码精品ⅤA| 中文字幕亚洲国产精品| 农村国产毛片一区二区三区女| 日韩熟妇精品视频一区二区| 国产av一区二区三区国产精品| 国产西西裸体一级黄色大片| 日韩精品有码在线视频| 国产成年无码aⅴ片在线观看| 南宁市| 台江县| 武定县| 国产亚洲高清在线精品不卡| 在线视频中文字幕二区| 日本免费一区二区三区在线观看| 在线免费不卡av网站一区| 久久精品国产亚洲av高清四虎| 元码人妻精品一区二区三区9| 日本一区二区三区在线播放| 文水县| 亚洲精品国产主播一区二区| 久久精品女人天堂av影院| 国产美女主播在线一区| 91精品一区二区三区蜜桃| 北票市| 亚洲精品一区二区三区四|