本發明涉及生物檢測領域,具體而言,涉及改性白蛋白作為封閉劑在免疫檢測中的相關應用。
背景技術:
1、在免疫診斷領域,利用固相載體實現b/f分離是常用的方法。例如,膠體金側向層析法利用硝酸纖維膜作為載體,elisa(酶聯免疫分析法)中利用酶標板作為載體,cleia(化學發光免疫分析法)中利用磁微粒作為載體等等。以cleia為例,在免疫檢測過程中,磁微粒上的包被抗體與分析物之間進行抗體-抗原反應,通過磁分離可以將免疫復合物從待檢樣本中分離,再加入標記抗體與之反應,由標簽產生信號,實現對待測物質的定量或者定性分析。各類使用固相載體的免疫檢測方法靈敏度都受到標記抗體與固相載體之間非特異性結合所產生的背景信號的影響,在這種情況下,即使待測物不存在樣品中,也可能顯示正測量值,導致與真實值之間出現偏差。
2、針對標記抗體與固相載體之間非特異性結合的問題,使用更嚴苛的后處理條件,比如,優化標記抗體和磁珠的工作液濃度,調節工作液的ph等手段或許可以一定程度上減輕非特異性吸附產生的本底信號,但是這些解決方案需要在檢測性能方面進行權衡。例如,引入更強的洗滌程序可能導致信號丟失,改變標記或者包被抗體的濃度可能會使抗原捕獲不足,從而降低檢測靈敏度。
3、鑒于此,特提出本發明。
技術實現思路
1、本發明的目的在于提供電荷改性白蛋白作為封閉劑在免疫檢測中的相關應用。
2、本發明是這樣實現的:
3、第一方面,本發明實施例提供了改性白蛋白在制備用于免疫檢測的封閉劑中的應用,所述改性白蛋白包括正電荷化白蛋白和負電荷化白蛋白中的任意一種或多種。其中,正電荷化白蛋白搭配負電荷性固相載體使用,負電荷化白蛋白搭配正電荷性固相載體使用。
4、第二方面,本發明實施例提供了一種免疫檢測方法,其包括:采用前述實施例所述的改性白蛋白封閉的固相載體進行b/f分離。
5、第三方面,本發明實施例提供了一種免疫檢測的試劑、試劑盒或封閉劑,其包括:前述實施例中所述的改性白蛋白。
6、本發明具有以下有益效果:
7、本發明通過采用經化學修飾后表面帶電荷的bsa作為免疫檢測中的封閉蛋白,提高了封閉劑對于固相載體的表面親和力,避免或減少了現有封閉劑易被取代的問題,降低了免疫檢測過程中的非特異性吸附,從而有效提高免疫檢測的靈敏度。
1.改性白蛋白在制備用于免疫檢測的封閉劑中的應用,其特征在于,所述改性白蛋白包括正電荷化白蛋白和負電荷化白蛋白中的任意一種或多種。
2.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述正電荷化包括氨基化或嗡離子化,所述負電荷化包括羧基化、磺酸基化、硫酸基化、磷酸基化或膦酸基化;
3.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述正電荷化白蛋白為氨基化白蛋白。
4.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述負電荷化白蛋白為羧基化白蛋白。
5.根據權利要求1所述的應用,其特征在于,所述白蛋白包括bsa或hsa。
6.根據權利要求1~5任一項所述的應用,其特征在于,所述免疫檢測為非均相免疫檢測;
7.根據權利要求1~5任一項所述的應用,其特征在于,所述封閉劑用于封閉固相載體;
8.一種免疫檢測方法,其特征在于,其包括:采用權利要求1-7任一項所述的改性白蛋白封閉的固相載體進行b/f分離;
9.一種用于免疫檢測的試劑或試劑盒,其特征在于,其包括:權利要求1~7任一項中所述的改性白蛋白。
10.根據權利要求9所述的試劑或試劑盒,其特征在于,所述試劑或試劑盒還包括固相載體;