本發(fā)明屬于基因工程,具體涉及柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、柑橘是世界上廣泛栽培的水果之一,它不僅營(yíng)養(yǎng)風(fēng)味俱佳,還富含多種生物活性物質(zhì),其中類黃酮因具有廣泛的生理功能而備受關(guān)注。多甲氧基黃酮是柑橘中一類特殊的類黃酮化合物,特異性存在于柑橘果皮和葉片組織中,多甲氧基黃酮在唇形科植物中的的積累與其棲息地之間具有相關(guān)性,幫助植物適應(yīng)生態(tài)環(huán)境。水稻中積累的苜蓿素(5,7,4'-三羥基-3',5'-二甲氧基黃酮)可有效減少由土壤傳播的真菌介導(dǎo)根腐病蔓延。柑橘中的多甲氧基黃酮可抑制果實(shí)采后中常見(jiàn)的炭疽病菌和指狀青霉生長(zhǎng),在病原體防御方面有重要作用。同時(shí)多甲氧基黃酮被廣泛報(bào)道能夠幫助維持人體健康,在降低慢性疾病風(fēng)險(xiǎn)和增強(qiáng)免疫系統(tǒng)等方面有著重要作用。但針對(duì)多甲氧基黃酮生物合成的上游調(diào)控因子并不明確,因此,進(jìn)一步鑒別參與多甲氧基黃酮合成調(diào)控的轉(zhuǎn)錄因子對(duì)完善柑橘類黃酮合成代謝的調(diào)控網(wǎng)絡(luò),對(duì)實(shí)現(xiàn)多甲氧基黃酮工廠化合成具有重要意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于提供柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量中的應(yīng)用,本發(fā)明發(fā)現(xiàn)瞬時(shí)過(guò)表達(dá)citerf92可促進(jìn)柑橘多甲氧基黃酮的積累,對(duì)完善柑橘類黃酮合成代謝的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和對(duì)實(shí)現(xiàn)多甲氧基黃酮工廠化合成具有重要意義。
2、本發(fā)明提供了柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量中的應(yīng)用,所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
3、作為一種優(yōu)選方案,所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的核苷酸序列如seq?idno.2所示。
4、作為一種優(yōu)選方案,所述調(diào)控包括在柑橘基因組中過(guò)表達(dá)所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92,提高柑橘中多甲氧基黃酮的含量。
5、作為一種優(yōu)選方案,所述多甲氧基黃酮包括甜橙黃酮、川陳皮素、5,6,7,4'-四甲氧基黃酮、七甲氧基黃酮和橘皮素中的一種或多種。
6、本發(fā)明還提供了擴(kuò)增柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的引物組,所述引物組包括正向引物和反向引物;
7、所述正向引物的核苷酸序列如seq?id?no.3所示;所述反向引物的核苷酸序列如seq?id?no.4所示;所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
8、本發(fā)明還提供了一種包含所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的生物材料,包括含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組表達(dá)載體和/或含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組微生物;
9、所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
10、作為一種優(yōu)選方案,含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組表達(dá)載體的基礎(chǔ)骨架包括pbi121載體。
11、本發(fā)明還提供了所述的引物組或所述的生物材料在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量和/或創(chuàng)制新種質(zhì)中的應(yīng)用。
12、本發(fā)明還提供了一種提高柑橘中多甲氧基黃酮含量的方法,包括如下步驟:在目標(biāo)柑橘基因組中過(guò)表達(dá)柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92;
13、所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
14、作為一種優(yōu)選方案,所述柑橘包括冰糖橙。
15、有益效果:本發(fā)明提供了柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量中的應(yīng)用。本發(fā)明通過(guò)在冰糖橙果皮中瞬時(shí)表達(dá)citerf92,發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組相比,過(guò)表達(dá)組中甜橙黃酮、川陳皮素、5,6,7,4'-四甲氧基黃酮、七甲氧基黃酮和橘皮素的含量均出現(xiàn)了不同程度的上調(diào),表明瞬時(shí)過(guò)表達(dá)citerf92可促進(jìn)柑橘多甲氧基黃酮的積累。可見(jiàn)本發(fā)明所述轉(zhuǎn)錄因子citerf92參與并調(diào)控多甲氧基黃酮合成,對(duì)完善柑橘類黃酮合成代謝的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)和對(duì)實(shí)現(xiàn)多甲氧基黃酮工廠化合成具有重要意義。
1.柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量中的應(yīng)用,其特征在于,所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的氨基酸序列如seq?id?no.1所示。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于,所述調(diào)控包括在柑橘基因組中過(guò)表達(dá)所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92,提高柑橘中多甲氧基黃酮的含量。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3任一項(xiàng)所述的應(yīng)用,其特征在于,所述多甲氧基黃酮包括甜橙黃酮、川陳皮素、5,6,7,4'-四甲氧基黃酮、七甲氧基黃酮和橘皮素中的一種或多種。
5.擴(kuò)增柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的引物組,其特征在于,所述引物組包括正向引物和反向引物;
6.一種包含所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的生物材料,其特征在于,包括含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組表達(dá)載體和/或含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組微生物;
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的生物材料,其特征在于,含有所述柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92的重組表達(dá)載體的基礎(chǔ)骨架包括pbi121載體。
8.權(quán)利要求5所述的引物組或權(quán)利要求6或7所述的生物材料在調(diào)控柑橘多甲氧基黃酮含量和/或創(chuàng)制新種質(zhì)中的應(yīng)用。
9.一種提高柑橘中多甲氧基黃酮含量的方法,其特征在于,包括如下步驟:在目標(biāo)柑橘基因組中過(guò)表達(dá)柑橘erf類轉(zhuǎn)錄因子citerf92;
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,所述柑橘包括冰糖橙。